科捷教您根據色譜圖的變化判斷液相色譜儀器故障

一、米糠發酵過程中脂肪酸組分測定分析氣相色譜儀價格配置

稻米作為人們生活日常中主要的糧食之一，在我國的產量是對高的，是一種一年生草本植物，性喜溫濕，中國南方俗稱其為“稻谷”或“谷子”，脫殼的糧食是大米，被脫掉的殼是米糠，是由外果皮、中果皮、交聯層、糊粉層以及種皮組成，約占整個稻米的5.5%~10%。國內外的研究結果和資料表明，米糠中富含各種營養素和生理活性物質?，F在美國等發達國家已經有食用米糠問世，中國也有類似產品被發明，即應用現代食品加工精準碾制技術將米糠中的不益食物質（稻殼、果皮、種皮、灰塵、微生物等）與益食營養物質（胚、糊粉層等外層胚乳）在潔凈的生產車間里進行精準碾磨分離，此分離技術可將米糠分級為飼料級米糠和食品級米糠兩部分，其中食品級米糠約占米糠總重量的80%，營養的90%以上。因為食品級米糠雖然只占稻谷重量的6%，且占稻谷營養的約60%，是大米碾白過程中的碾下物，所以其也被人們稱為“米珍”或是“米粕”。米糠含蛋白質12%~16%、脂肪14%~23%，富含B族、E族維生素、礦物質和膳食纖維，隨著大豆及其產物的價格不斷上漲，以及米糠的穩定化技術的不斷革新，富含多種營養成分和功能因子的米糠作為食品配料在食品工業中的潛在用途可能大大增加，發酵食品作為傳統食品領域的重要部分，由于其特有的營養、功能和口感，一直為很多人所喜愛。安全、良好的微生物是發酵食品的基礎。紅曲、木耳等一些藥食同源真菌，為人們所食用了幾千年，其保健功能也得到了公認。利用這些真菌的功能特性結合米糠營養，利用生物發酵技術，開發新型功能性食品，以實現米糠作為食品的新突破，可能成為另一條米糠的潛在利用途徑。米糠本身作為一種良好的食品新資源，其發酵過程中各成分的變化如何，發酵后性質變化如何，還未有報道。由于脂肪酸是米糠的主要成分，其組分也是米糠的典型標志物，因此，本文從米糠脂肪酸入手，以藥食同源的紅曲、木耳為菌種，利用氣相色譜儀建立對米糠發酵過程中脂肪酸組分測定分析研究，以測定米糠發酵過程中各種脂肪酸的組分及含量的變化情況，為深入研究和開發米糠奠定基礎。 實驗表明，此米糠發酵過程中脂肪酸組分測定分析氣相色譜儀非常適用，能快速、高效、準確的完成實驗分析。值得推薦使用！

二、儀器與材料準備

1、材料

新鮮米糠（購與超市，取回后放于-18℃冰箱凍存。）

菌種：紅曲M180，木耳A900（于4℃冰箱保存）。

土豆：購于超市。

2、試劑準備

甲醇、氫氧化鉀、濃硫酸、葡萄糖等分析純試劑；

正己烷：HPLC級；

谷物脂肪酸甲酯混合標準品(10mg/mL)。

3、儀器準備

米糠發酵過程中脂肪酸組分測定分析氣相色譜儀GC6891N，隔水式恒溫培養箱，微型旋渦混合儀，恒溫調速搖瓶柜，立式壓力蒸汽滅菌鍋，生物潔凈工作臺，水浴鍋。

三、氣相色譜儀對米糠發酵過程中脂肪酸組分測定分析步驟

1、樣前處理

粗脂肪：按GB/T5009.6—2003方法進行；

淀粉：按GB/T5009.9—2003方法進行；

米糠成分檢測粗蛋白：按GB/T5009.5—2003方法進行；

灰分：按GB/T5009.4—2003方法進行；

水分：按GB/T5009.3—2003方法進行。

2、土豆斜面培養基配制

將土豆洗凈去皮，稱取200g切成小塊，放入燒杯中，加水1000mL，煮沸30min，過濾。向濾液中加入20g瓊脂條，加熱攪勻，待全部融化后，加入20g葡萄糖，攪拌均勻。補水至1000mL，再次攪拌均勻。趁熱分裝到試管中，封口。121℃高壓滅菌15min。1.2.2.2米糠液體培養基取純米糠裝于三角瓶中，以1:9(w:v)的比例加入純凈水，封口搖勻。121℃高壓滅菌15min。

3、菌株培養

試管斜面培養接菌種于土豆斜面培養基上，30℃恒溫培養至菌種生長旺盛期。種子搖瓶培養分別接1cm2紅曲、木耳斜面培養基于已滅菌的裝有100mL米糠液體培養基的250mL三角瓶中，置于30℃、200r/min的控溫搖床中培養72h。液體搖瓶培養以10%的接種量分別接紅曲、木耳種子培養液于裝有200mL米糠液體培養基的500mL三角瓶中，置于30℃、200r/min的控溫搖床中培養4~7d。

4、樣品制備

從種子培養液接入米糠液體培養基開始，每天定時分別從培養基中取樣5mL，儲存在-18℃冰箱中，待用。室溫下，取15mL帶蓋耐熱試管，加入0.7mL用水配成的10mol/L的KOH、5.3mL甲醇，同時取1.0g樣品加入其中。試管在55℃水浴1.5h，每20min拿出來強烈振蕩5s，使樣品更好的均勻的水解。取出試管，冷水降至室溫。加入0.58mL用水配成的12mol/L的H2SO4。倒轉混勻試管內溶液，再在55℃水浴1.5h，每20min拿出來強烈振蕩5s。脂肪酸甲酯化結束后，冷水降至室溫。加入3mL正己烷，旋渦混合5min。離心5min，將含有脂肪酸甲酯的正己烷層儲存在氣相分析瓶中，儲存在-18℃冰箱中，待用。

5、氣相色譜分析條件

GC6891N氣相色譜儀，色譜柱為CBP-20毛細管柱(50m×0.25mm×0.25μm)，載氣：N2，流速30mL/min，進樣口溫度280℃，柱子初始溫度180℃，以6℃/min的速度升至240℃，保持40min；氫火焰離子化檢測器(FID)，溫度280℃?？諝饬魉?00mL/min，氫氣流速47mL/min。

四、結果討論 （米糠發酵過程中脂肪酸組分測定分析氣相色譜儀價格配置）

1、米糠成分分析

米糠是一種營養十分豐富的生物資源，富含蛋白質、脂肪和碳水化合物。米糠基本成分測定見表1，測定結果與其他報道基本相同，略有一些差異，這可能與米糠的稻谷品種、生長條件和碾米工藝不同有關。米糠富含微生物生長的營養物質，可作為一種優良的培養基，適于不同微生物生長所需。經過實驗證明，紅曲和木耳在以米糠作為單一營養來源培養基上生長良好。

2、谷物脂肪酸甲酯混合標準品氣相分析

經氣相GC6891N氣相色譜儀分析，谷物脂肪酸甲酯混合標準品測定結果見圖1，其各種脂肪酸的具體含量如表2所示。

3、紅曲發酵米糠脂肪酸氣相分析

在紅曲發酵米糠過程中，隨發酵時間增加，液體培養基開始呈現黏稠的粥狀，并隨時間增加越來越稠，顏色變成紅紫色。取紅曲發酵的米糠樣品，甲酯化處理，經GC分析，其檢測結果見圖2和表3。

由圖2和表3可以看出，各種脂肪酸含量隨發酵時間的延長而降低。經分析得出，發酵過程中脂肪酸的含量由Z初的200.75mg/g下降至68.35mg/g，其中飽和脂肪酸由39.97mg/g下降至11.01mg/g，不飽和脂肪酸由160.78mg/g下降至57.25mg/g，米糠不飽和脂肪酸占總脂肪酸的比例由原來的80.09%上升至83.76%。由此可以看出，在紅曲發酵過程中，不飽和脂肪酸占總脂肪酸的百分含量沒有得到明顯提高，而脂肪總量快速下降。

4、木耳發酵米糠脂肪酸氣相分析

在木耳發酵米糠過程中，伴隨發酵時間延長，液體培養基開始呈現小米粥狀，個別出現白色菌絲體。取木耳發酵的米糠樣品，甲酯化處理，經GC分析，檢測結果見圖3和表4。

由圖3和表4可以看出，各種脂肪酸含量同樣隨發酵時間的延長而降低，菌種對脂肪酸的消耗和酯酶的分解作用大于脂肪酶的合成作用。經分析得出，發酵過程中脂肪酸的含量由初始的200.75mg/g下降至79.95mg/g，其中飽和脂肪酸由39.97mg/g下降至15.32mg/g，不飽和脂肪酸由160.78mg/g下降至64.64mg/g，米糠不飽和脂肪酸占總脂肪酸的比例由原來的80.09%上升至80.84%。由此可以看出，同樣在木耳發酵過程中，不飽和脂肪酸占總脂肪酸的百分含量也沒有得到明顯提高，脂肪酸含量在快速降低。但由于木耳發酵時間比紅曲長，因此，在脂肪酸的利用上，木耳比紅曲利用效率低?？赡苡捎谏锟偭坎蝗缂t曲增長迅速，或者兩者對米糠中不同營養物質優先利用程度不同。

五、氣相色譜儀對米糠發酵過程中脂肪酸組分測定分析結果

米糠液體發酵過程中，紅曲M180和木耳A900均能有效利用脂肪酸，但對各種脂肪酸的消耗情況不同，加上微生物自身也能合成一些脂肪酸，從而通過發酵改變了米糠脂肪酸的組分和含量。由以上研究可知，隨著發酵時間的增加，不飽和脂肪酸占總脂肪酸的比例有所增加，但是效果并不明顯，因此，米糠在發酵過程中，并沒有對一些功能性多不飽和脂肪酸起到提高或累積作用，沒有達到富集目的。對米糠脂肪酸的分解與利用，紅曲效果較好，可能源于紅曲能產生孢子，生物量高，而黑木耳在發酵過程中，不產生孢子，生物量較低，因此，利用紅曲可快速有效地降低米糠中脂肪含量，可作為一種抑制米糠酸敗的潛在途徑。下一步的研究內容是紅曲M180和木耳A900的脂肪酶活特性，以及在其他能量物質(糖類、蛋白質等)共存前提下，如何進行能量優先利用，以及自身脂肪酸的合成情況。

六、米糠發酵過程中脂肪酸組分測定分析氣相色譜儀價格配置如下：

可以按測試項目需求自有搭配配置！